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1.內毒素專用超濾膜 脂多糖結構的內毒素在水溶液中團聚成膠團狀締合物，在膜分離過程中，膠團與膜接觸時會影響其存在形式，其外緣親水鏈如果與膜的親合力很強，團聚分子會因糖鏈與膜之間過強的親合力而分散，改變了團聚狀態，因此，一般超濾膜截留的是在膜表面分散的單分子。 本項目發明的關鍵在于，調節膜材質，減小超濾膜對膠團外緣糖鏈的親和力，使內毒素在膜表面仍呈團聚態，從而實現對團聚大分子的截留。膜材質及膜孔徑的優選，使大孔徑膜在實現去除熱原的同時，不會對一般中藥成分（如人參皂苷類成分等）造成明顯影響。 內毒素專用超濾膜孔徑為5-20萬分子量，試驗中測得內毒素去除率達90%以上，對中藥成分（如三七或人參成分）無明顯影響，；待測藥液（內毒素濃度5-5000EU/ml），超濾后（可二級超濾）內毒素濃度在安全限度之內 2.內毒素在線監測儀 實驗中偶然發現內毒素的粒徑分布與內毒素濃度具有相關性，高濃度內毒素的粒徑分布主要在200~500 nm之間；低濃度內毒素的粒徑主要分布于10~20 nm和200~500 nm之間，因此本項目從內毒素存在的膠粒光學特征中獲得啟發，依據激光散射技術，研制符合注射劑生產中的內毒素檢測的專屬儀器，此儀器應以控制注射劑生產中內毒素污染為目標，其特征為在線、快速、高靈敏，且價格低廉，實現生產線中的內毒素在線監控。

2.1 新型內毒素檢測儀的研制 2.1.1針對細菌內毒素團聚后的光學特征，使用高性能硬件，優化光路和散射光接收器，提高內毒素檢測靈敏度，并匹配適于內毒素粒徑分布的計算分析軟件。進一步對檢測器結構進行改造粒徑檢測儀酒精檢測儀，適宜于在線檢測，并設計預警軟件，對生產線中實時取樣的樣品液中的細菌內毒素采用檢測曲線控制，設定安全范圍，從而實現在線檢測、預警一體化的細菌內毒素檢測儀器。 2.1.2內毒素檢測儀裝置結構 此新型的內毒素在線檢測的內部構造包括：光源、光束處理單元、在線檢測池、散射光接收器及相應的數據轉換處理系統。 光源采用波長632.8nm的He-Ne激光器雙光束，只選擇顆粒真正產生的單散射信號部分，去除干擾信號，激光源在降低對樣品熱效應的同時，加大功率，并針對樣品，選擇合適的發射功率和波長，自動調節激光衰減； 對散射光接受器為光電二極管(APD)檢測器，多角度多點接收，暗基數小，靈敏度高粒徑檢測儀，速度快，性能穩定，通過光電二極管將散射光信號接收并轉換成電信號，并配有相應的電信號放大器。 數據處理器是對光強轉化的電信號，經自相關運算得到相關曲線，再由相應的軟件分析出平移擴散系數，最后經stoken-Einstein公式，計算出粒徑分布。

2.1.3檢測池在線性改造 目前粒徑檢測儀中所采用的檢測池，均是針對樣品離線檢測而設計的,此檢測池通過外加樣品，將樣品池放于檢測器中進行檢測，無法避免環境中微粒對檢測結果的影響；在對不同樣品測試時，還需要通過清洗粒徑檢測儀，更換藥液，容易引起待檢測樣品之間的交叉污染，此檢測池無法滿足注射劑的在線檢測的要求. 經過本項目組的試驗考察，根據注射劑生產線特點，研制出適于注射劑生產線中在線檢測的樣品檢測池，采用類似流動比色池的方法，與檢測樣品溶液直接連接，實現注射劑生產的在線監控.此檢測池可以實線與生產線的同步連接、監控，根據注射劑品種設置采樣點間隔，關閉進液口和出液口，使待檢測溶液呈現靜止狀態，對注射劑內毒素污染狀況進行監控. 2.1.4在線預警軟件 根據內毒素粒徑分布峰強度、粒徑分布范圍與內毒素濃度的相關性。分別檢測不同細菌內毒素濃度粒徑分布圖，并制作各濃度標準圖譜，在對注射劑進行生產線在線監控時，對實時監控的粒徑分布圖與內毒素超標圖譜進行相似度計算，當相似度大于0.9時，觸發預警開關. 對注射劑生產過程監控時，當細菌內毒素濃度超過注射液限度值時，粒徑分布峰會發生明顯變化，同時相似度曲線發生大幅波動，觸發預警系統，從而關閉生產管路，及時發現污染，最大程度的保證已生產出成品的安全性，減少企業的經濟損失。

2.1.5內毒素檢測儀樣機 本項目組研制出的內毒素檢測儀是世界首臺基于內毒素在溶液中存在狀態，能實現在線檢測的內毒素檢測儀。測試過程在電腦控制下全自動完成，自動選擇最佳測試參數（如通道數、延時時間等），工作穩定可靠，操作方便 ，測試速度快，每測一個樣品只需2～5分鐘甲醇報警器，可多次全自動連續測試，達到最佳的測試精度和重復性。 ①技術性能：在3min內可以完成樣品取樣、檢測、結果輸出，并通過預警曲線反映制劑中細菌內毒素的水平，其檢測最低限達到0.25EU/ml，在注射用水（0.5EU/ml）及制劑的安全范圍之內。 ②技術參數：儀器檢測指標：1、粒子檢測范圍：1-1000nm 2、波長準確度：誤差≤0.1° 3、細菌內毒素檢測限：≤0. 25EU/ml 4、細菌內毒素濃度范圍：0. 5-100EU/ml 5、重現性：重現性的典型誤差均小于1% 6、樣品檢測周期：1-3分鐘。 7、準確度：小于國際標準ISO13321允許誤差范圍； 8、儀器檢測類型：固定比色池與連續檢測的流動檢測池在線監控指標：1、在線檢測結果與離線檢測結果的差異性低于5% 2、檢測池流速可調，樣品異常在6分種內完成報警 3、檢測池體積：0.5-5ml 4、預警限度范圍：與內毒素超標圖譜相似度大于0.9或內毒素含量變化超過50%，自動預警軟件 5、連續檢測頻度：次/5-10分鐘，具體由實際生產條件確定。 ③技術水平：此儀器對細菌內毒的檢測充分考慮了注射劑特別是中藥注射劑的生產特點，這在國內外將是首次以檢測細菌內毒素的粒徑分布特征，檢測周期低于3min，已經研制出的內毒素檢測儀靈敏度達到目前注射用水內毒素含量限度指標（0.5EU/ml），超過制劑內毒素含量限度指標（1-10EU/ml）

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